HPLC结合Kromasil C18色谱柱检测葡萄酒中的有机酸时氮吹条件的选择

YTU王罡

洗脱剂的选择：SPE法萃取葡萄酒中的有机酸时用到的洗脱剂主要有乙腈、甲醇和四氢呋喃，其洗脱能力顺序为甲醇<乙腈<四氢呋喃。萃取步骤的洗脱剂与氮吹后的复溶溶剂以及色谱条件中有机流动相的选取密不可分。由于四氢呋喃具有较强的毒性，且紫外吸收截止波长为220 nm，大于实际检测波长210 nm，对检测响应值有较大影响，所以本实验不做考虑。乙腈和甲醇相比具有极性参数大、吸光度高、与水混合不增加柱内压力、洗脱能力强的优点，但另一方面，乙腈存在着价格较高、致使色谱峰的峰形出现较大拖尾、流动相不易脱气等问题。结合实验前后步骤的条件筛选以及实际样品量综合考虑，最终选取5 mL的甲醇作为洗脱剂。
氮吹条件的优化：依据已有经验选取同一样品，经过SPE后，设置六组对照实验，第一组30℃水浴、低速氮吹至近干；第二组30℃水浴，高速氮吹至近干；第三组40℃水浴，低速氮吹至近干；第四组40℃水浴、高速氮吹至近干；第五组50℃水浴、低速氮吹至近干；第六组50℃水浴、高速氮吹至近干。比较不同氮吹条件对同一种葡萄酒样品中11种目标有机酸的回收率的影响，如图3-5所示。通过对比发现第三组条件比其他提取溶剂的回收率要高，在98.2%~102.5%之间。综合考虑，最终选取40℃水浴，低速氮吹至近干。
这是我用过的方法，欢迎各位老师交流。