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[求助] 做大肠菌的实验时,导管有气泡怎么办?

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(情渺)

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发表于 2010-9-2 19:48 | 显示全部楼层 |阅读模式 |阅读模式 |发表于:广东省
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在做大肠菌实验时,在往试管加入月桂基胰蛋白栋肉汤时,导管是没气泡的,然后用报纸包扎好放入高温消毒,在一定的压强下消毒15分钟后,拿来冷却,却发现导管内有气泡,请问一下这是什么原因造成的?有气泡,有没有什么方法可以消除气泡?是不是有气泡,大肠菌试验就要重新做过了?望有知者,请多多指教,谢谢
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(蛛~ 蛛~)

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发表于 2010-9-3 11:24 | 显示全部楼层 |发表于:四川省
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这个问题版里有好多帖子,以前讨论了很多,你好好翻下吧
凌云生物科技http://shop108145083.taobao.com
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(情渺)

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 楼主| 发表于 2010-9-3 14:15 | 显示全部楼层 |发表于:广东省
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回复 2# cgspider
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 楼主| 发表于 2010-9-3 14:17 | 显示全部楼层 |发表于:广东省
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这样呀,那我得好好地找一下了,还是谢谢你了
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(浅浅流水)

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[LV.1]初来乍到

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发表于 2010-9-3 17:23 | 显示全部楼层 |发表于:广西
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又是因为 强行冷却了。
多一些耐心 让它们自然冷却吧!
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(情渺)

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 楼主| 发表于 2010-9-3 19:24 | 显示全部楼层 |发表于:广东省
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回复 5# corolla13
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(情渺)

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 楼主| 发表于 2010-9-3 19:25 | 显示全部楼层 |发表于:广东省
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我已经找到答案了,谢谢你.**原因一:过早打开灭菌锅
当灭菌锅压力表示数为0而温度表示数还高与室温时,不要打开灭菌锅。因为打开锅盖瞬间,锅内大量热量散出,温度突然降低,试管内温度也随着降低,导致管内气减小,沸点降低,部分水会汽化留在小导管内。
解决办法:等灭菌锅内气压和温度都降到与室温一致或相差不大时再打开灭菌锅。
**原因二:试管塞塞得太紧(使用硅胶塞的时候)
      试管塞塞得太紧在灭菌时会导致试管内与灭菌锅内压力不一致。在灭菌锅升温升压时,锅内压力会大于管内压力;灭菌锅降温降压时,锅内压力小于管内压力。锅内压力会大于管内压力时,试管内压力不够,不能将小导管内气体排尽,就留有气泡;锅内压力小于管内压力时,可能会使试管塞和培养基崩出,培养基报废。
      解决办法:改用透气性好的棉花塞,切勿使用橡皮塞。
*原因三:小导管口太小
      我们可以把一根毛细管一端封口,另一端插进水里,毛细管里怎么都不会进水。同样把一个烧杯倒扣进水里就很容易进水了。小导管在加压后一方面水要进去,另外里面的空气要出来,如果口太小的话,空气不容易出去,水也不容易进来,就会导致气泡六在里面了。
      解决办法:改用内空较大的导管,尽量使用V型管,不要使用锥型管。
原因四:培养基质量引起
      由培养基质量引起的气体不能排尽或培养基含有高温高压分解产气的成分。灭菌时用水做培养基组的对照试验,若培养基组有气泡,而对照组没有气泡,可确定是有此原因引起。
解决办法:改用其它培养基。
原因五:灭菌锅工作压力不够,使气体不能排尽
      灭菌锅最大压力不够不能使管内液体强行把气体挤出,最后还留有小气泡,还会使温度上升缓慢,或达不到灭菌温度。此原因的可能性较小,我们可以在排除原因一、二、三、四的情况下,用不加试管塞、大口导管做试验,若还仍不能达到效果,就要检查灭菌锅了。
      解决办法:修理灭菌锅。
注意事项:1  * 为主要原因。
          2  不要将试管倒置,以免试管口和试管塞受培养基污染。


      
        摇一摇试管,如果有大量类似啤酒的气泡徐徐上升有可能是大肠菌群产气,如果只是小导管里的气泡,导管外无气泡上升,可能是因为杀菌过程中的压力变化引起的,没关系,把试管倒置,把小导管里的气泡排除即可。
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[LV.4]偶尔看看III

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发表于 2010-9-6 19:05 | 显示全部楼层 |发表于:山东省
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排气没有排好或者过早打开灭菌锅,如果气泡量很小很小可以在试管上做个标记在培养48小时后在观察标记的试管
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发表于 2011-7-15 09:28 | 显示全部楼层 |发表于:浙江省
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谢谢!很好。不用重做了。
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发表于 2013-6-20 13:32 | 显示全部楼层 |发表于:安徽省
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corolla13 发表于 2010-9-3 17:23
又是因为 强行冷却了。
多一些耐心 让它们自然冷却吧!

压力已经自然降到0了 温度也是室温了
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发表于 2013-6-23 23:38 | 显示全部楼层 |发表于:四川省
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我觉得等他自然冷却后就会没有了吧
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(风车)

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发表于 2014-8-29 14:48 | 显示全部楼层 |发表于:上海
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