关于镜检的一个问题

wangxu704150852 · 发表于 2015-4-21 11:06

在很多需要镜检的标准中都会说明所见菌种的除了革兰氏染色以外的其他特性，比如是否有芽孢，是否有荚膜，以及大小。大小的话还比较容易估算，但是我觉得荚膜和芽孢，对于像我这样的新手来说实在是没有办法通过简单的革兰氏染色法去判断，国标当中也没有看到相关的内容，我查过以前的课本和相关的资料，但是没有统一的方法，而且我使用课本中的Anthony染色法好像我试了，效果也不太好，可能是我个人原因。。。在这里问问各位老师是使用什么方法进行判定的，有没有统一的标准，以及具体的操作方法

yuqi3209231984G · 发表于 2015-4-21 11:24

除革兰氏染色，有一个简单方法：氢氧化钾拉丝试验，拉丝试验主要用于用革兰染色不易区分的细菌.

wnh3yang · 发表于 2015-4-21 13:17

楼上看是吗？

9111 · 发表于 2015-4-22 15:02

能否分享一下氢氧化钾拉丝实验怎样做呀？谢谢！

kiki8908 · 发表于 2015-4-23 11:20

氢氧化钾拉丝试验
(1)原理：革兰阴性细菌的细胞壁在稀碱溶液中易于破裂，释放出未断裂的DNA螺旋，使氢氧化钾菌悬液呈现粘性，可用接种环搅拌后拉出粘丝来，而革兰阳性细菌在稀碱溶液中没有上述变化。

　　(2)方法：取1滴40g/L氢氧化钾水溶液（应新鲜配制）于洁净玻片上，取新鲜菌落少许，与氢氧化钾水溶液搅拌混匀，并每隔几秒钟上提接种环，观察能否拉出粘丝。

　　(3)结果：用接种环拉出粘丝者为阳性，仍为混悬液者为阴性。

　　(4)应用：主要用于革兰阴性菌与易脱色的革兰阳性菌的鉴别。大多数革兰阴性菌于5~10s内出现阳性反应，有的则需30~45s，假单胞菌、无色杆菌、黄杆菌、产碱杆菌、莫拉菌等大多数在10s内呈阳性，不动杆菌、莫拉菌反应较慢，大多数菌株在60s内出现阳性，而革兰阳性菌在60s以后仍为阴性。

kiki8908 · 发表于 2015-4-23 11:21

9111 发表于 2015-4-22 15:02
能否分享一下氢氧化钾拉丝实验怎样做呀？谢谢！

氢氧化钾拉丝试验
(1)原理：革兰阴性细菌的细胞壁在稀碱溶液中易于破裂，释放出未断裂的DNA螺旋，使氢氧化钾菌悬液呈现粘性，可用接种环搅拌后拉出粘丝来，而革兰阳性细菌在稀碱溶液中没有上述变化。

　　(2)方法：取1滴40g/L氢氧化钾水溶液（应新鲜配制）于洁净玻片上，取新鲜菌落少许，与氢氧化钾水溶液搅拌混匀，并每隔几秒钟上提接种环，观察能否拉出粘丝。

　　(3)结果：用接种环拉出粘丝者为阳性，仍为混悬液者为阴性。

　　(4)应用：主要用于革兰阴性菌与易脱色的革兰阳性菌的鉴别。大多数革兰阴性菌于5~10s内出现阳性反应，有的则需30~45s，假单胞菌、无色杆菌、黄杆菌、产碱杆菌、莫拉菌等大多数在10s内呈阳性，不动杆菌、莫拉菌反应较慢，大多数菌株在60s内出现阳性，而革兰阳性菌在60s以后仍为阴性。